Информация, получаемая при исследовании прозрачных биологических сред, — плазмы крови, протоплазмы, слюны, мочи и др. имеет большое значение для диагностики заболеваний. Однако, исследование непрозрачных (мутных) сред или смесей микрочастиц или клеток, куда можно отнести в первую очередь кровь, традиционными оптическими методами является достаточно проблематичным. Принимая во внимание это, привлечение ППР для контроля параметров неразведенной крови кажется привлекательным. Следует заметить, что в этом случае благодаря большому угловому сдвигу минимуму (несколько градусов) значительно смягчаются требования к поверхностным свойствам золотой пленки ППР биосенсора, поскольку основной эффект связан именно с показателем преломления среды (крови), а молекулярные слои связаны на поверхности будут играть роль поправочных факторов. В таком случае открывается путь к многократному применению того же чипа без операции очистки.
С целью получения количественной информации с помощью измерительного комплекса на базе прибора ПЛАЗМОН- 6 были проведенные исследования угловых зависимостей ППР в случаях контакта золотой поверхности с кровью трех групп доноров, как здоровых, так и страдающих онкозаболеваниями головного мозга разной степени злокачественности. Работы проводились в Институте нейрохирургии им. акад. А. П. Ромоданова АМНУ и ИФН НАНУ.
Для исследований были использованы плазма крови, гепаринизированная кровь здоровых и больных доноров, эритроцитарная масса, полученная после центрифугирования и кровь с добавкой цоликлона. Каждый цикл измерений был проведен не менее, чем трехкратно. Для всех образцов крови проведено независимое измерение скорости оседания эритроцитов СОЭ.
На рис. 1 показанные типе кривые ППР для случаев контакта золотой поверхности чипа с водой, раствором Рингера, плазмой, кровью и клеточной массой. Видно, что все кривые имеют классический минимум, глубина которого изменяется слабо. В отличие от этого, угол резонанса, φmin, значительно сдвигается вправо в ряду «вода — раствор Рингера — плазма — кровь — клеточная масса».
После замены крови на раствор Рингера φmin не возвращается к первоначальному значению.
Рис. 1. Угловые зависимости отражения в области поверхностного плазмонного резонанса для образцов крови здорового донора. 1 — вода, 2 — раствор Рингера, 3 — плазма крови, 4 — гепаринизированная кровь, 5 — клеточная масса крови.
Исследовали группы больных с глиомами головного мозга разной степени злокачественности, которые проходили курс комплексного лечения, включая хирургическое вмешательство, в Институте нейрохирургии им. акад. А. П. Ромоданова АМН Украины. Исследования проводили в начале лечение (60 мин.) и через 7 суток после удаления внутримозговых опухолей (48 мин.)[33-37].
Гепаринизированную венозную кровь, взятую у больных на глиомой разной степени злокачественности, разделяли путем центрифугирования на клеточную фракцию и плазму. Клеточную фракцию использовали для определения показателей ППР. В качестве контроля аналогичный забор крови проводили у здоровых людей (10 чел.), которые прошли клиническое обследование перед сдачей крови в пункте переливания крови при Институте нейрохирургии. В качестве группы сравнения использовали показатели, полученные у больных черепно-мозговой травмой (ЧМТ) средней степени тяжести (10 чел.) и с метастазами рака (Mt) в головной мозг (14 чел.).
Клеточную плотность глиом разной степени злокачественности определяли, проводя морфологическую обработку биопсий тканей мозга и опухолей с помощью системы анализа изображений IBAS — 2000 фирмы KONTRON (Germany) при увеличении микроскопа в 200 раз. Измеряли по 30 расстояний между ядрами клеток (в микрометрах) при разных степенях злокачественности глиом (увеличение микроскопа в 100 раз).
Размеры глиом определяли с помощью ЯМР-томографа «SOMATOM CR» фирмы Siemens (Germany), используя показатели диаметра и объема глиом (в см).
Величина φmin зависит от состояния здоровья организма. На рис.3.49. представлены нормированные статистические данные, полученные в Киевском Институте нейрохирургии в течение 1,5 лет. Всего сделано больше 400 измерений, которые обработаны стандартными статистическими методами. Легко видеть, что ППР отзыв, по существу нормируемая величина Δφmin закономерно уменьшается в ряду «здоровый — 1-я — 2-я — 3-я мера злокачественности глиомы — ЧМТ»
Рис. 2. Показатели ППР для: 1 — здоровый человек, 2 — глиома I степени, 3 — глиома ІІ степени, 4 — глиома ІІІ степени, 5 — черепно-мозговая травма.
Кроме того были исследованы клеточные элементы крови в процессе лечения больных. Как можно видеть из рис.2. в процессе лечения показатели ППР увеличиваются и приближаются к показателям здорового человека.Таким образом, можно сделать вывод, что изменения показателей ППР периферической крови проходят закономерно, коррелируя со степенью злокачественности глиом, при этом минимальные показатели фиксируются у пациентов с глиомами высокой степени злокачественности. Уменьшение показателей ППР в процессе прогрессии глиом отмечено нами также у больных с продолженным ростом опухолей, которые были госпитализированы в клинику для проведения повторных операций.
Рис. 3. Показатели ППР у больного глиомой III степени злокачественности в процессе лечения (безрецидивный период).
Эти результаты свидетельствуют в пользу возможности применения приборов типа ПЛАЗМОН для мониторинга процесса лечения больных.
Результаты проведенных исследований показали, что уровень изменений показателей ППР периферийной крови может коррелировать с клеточной плотностью глиом, отображая степень злокачественности этих опухолей. Показано, что изменения показателей ППР клеток крови у подопытных пациентов могут быть одним из факторов прогнозирования скорости прогрессии глиом в послеоперационном периоде, который позволит своевременно использовать превентивные методы по отношению к появлению рецидивов глиом.
- Грыдина Н.Я., Болтина И.В., Ушенин Ю.В., Самойлов А.В., Величко О.Н. Исследование связи между агрегацией клеток крови и хромосомными аберрациями лимфоцитов периферической крови у больных с глиомами головного мезга //
- Поленовские чтения.-2009, Санкт-Петербург, с.262-263.Спосіб кількісного визначення агрегації клітин периферичної крові методом поверхневого плазмонного резонансу, Гридіна Н.Я., Ушенін Ю.В., Нахаба О.О., Рябінська О.О., Патент на корисну модель № 43470 МПК G01N 21/00, Заявл. 13.11.2008; Опубл. 25.11.2009, Бюл. №16, 2009.N.Gridina,
- G.Dorozinsky, RKhristosenko, V.Maslov, A.Samoylov, Y.Ushenin, Y.Shirshov Surface Plasmon Resonance Biosensor// Sensors & Transdusers, Vol.149, Issue 2, February 2013, pp. 60-68
Диагностика и мониторинг лечения онкозаболеваний головного мозга человека: 19 комментариев
Уведомление: cialis over counter walmart
Уведомление: cialis for daily use
Уведомление: viagra pills
Уведомление: viagra prices
Уведомление: generic cialis
Уведомление: tadalafil 20 mg
Уведомление: stepmom gives son viagra
Уведомление: viagra generic
Уведомление: generic viagra online pharmacy
Уведомление: viagra for sale
Уведомление: generic cialis at walmart
Уведомление: cialis side effects dangers
Уведомление: no prescription cialis
Уведомление: viagra without doctor
Уведомление: viagra for sale canadian
Уведомление: ivermectin cost
Уведомление: ivermectin 12 mg tablets
Уведомление: generic cialis at walmart
Уведомление: teen porn